树突状细胞(Dendritic cells, DCs)在病原体的天然识别和随后的适应性免疫反应中具有至关重要的作用。虽然这些细胞存在于多种组织中,但其数量稀少,难以满足科学研究和临床应用的需要。因此,研究者们在探索多种方法以在体外培养和扩增DCs。对于小鼠而言,最常用的方法是通过从骨髓细胞诱导生成的骨髓来源树突状细胞(Bone Marrow-Derived Dendritic Cells, BMDCs)。这些细胞需要在一系列细胞因子的作用下进行体外分化,其中主要是粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)。BMDCs是研究免疫反应、抗原呈递及细胞免疫调控的重要工具。
近期,上海交通大学药学院的沈琦研究团队在著名学术期刊《Advanced Functional Materials》上发表了题为“Self-adjuvanting bacteriahydrogelfor SHP1 checkpoint inhibition in tumor-draining lymph nodes to enhance cancer immunotherapy”的研究成果。该研究开发的AAM水凝胶系统结合了多种机制,旨在通过提升DCs的免疫活性来增强肿瘤免疫治疗的效果。作者在BMDCs的诱导过程中使用了重组小鼠GM-CSF和小鼠IL-4,研究结果显示,MHV能够通过甘露糖受体特异性靶向BMDCs,并通过温和的光热效应诱导肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡(ICD),从而释放肿瘤抗原并激活BMDCs。
此外,苏州大学FUNSOM的陈倩团队在《Advanced Materials》上在线发表了题为“AMinimalist Pathogen-Like Sugar Nanovaccine for Enhanced Cancer Immunotherapy”的论文。在这项研究中,使用重组小鼠GM-CSF和IL-4诱导骨髓来源的细胞分化为BMDCs,并进行体外实验以验证疫苗的免疫激活和免疫通路,同时评估抗原特异性T细胞的增殖情况。
实验过程中,研究者使用了6-8周龄的C57BL/6小鼠,通过手术获取骨髓细胞并进行培养。在此过程中,关键材料包括磷酸盐缓冲液(PBS)、离心管、注射器、细胞过滤器和BMDCs培养基。通过注重细胞密度和培养因子的浓度,确保BMDCs的有效诱导与扩增。
在诱导BMDCs时,成熟的树突状细胞通常会通过流式细胞术检测表面标志物如CD11c、MHC-II及CD86等。为了提高BMDCs的诱导效率,建议优化细胞密度、调整生长因子的浓度、及时更换培养液等。此外,确保GM-CSF和IL-4的稳定性也至关重要,储存时需避免光照和高温。
通过以上研究与实践,品牌尊龙凯时人生就博在生物医疗领域显示出越来越重要的作用,进一步增强了对肿瘤免疫治疗的理解与应用。研究者们也建议如需进一步激活BMDCs以验证其完全成熟度,使用刺激因子如LPS、TNF-α等将有助于提升其免疫功能。